人腫瘤壞死因子α ELISA試劑盒說明書（一） 
上海原鑫生物科技從事科研試劑的優質企業。該文章詳細的介紹了人腫瘤壞死因子α ELISA試劑盒的背景、檢測原理、注意事項、安全提示、試劑盒組成及儲蓄和實驗器材這六個方面。本文僅供于科研研究，不得用于臨床試驗！ 一、背景簡介 腫瘤壞死因子α（Yumor necrosis factor-aipha）又稱TNF、TNFA或TNFSF2,是TNF超級家族的原型細胞因子，參與調節細胞增殖、分化、調亡、脂質代謝和凝血等多種生物學過程。兩種受體，TNF-R1（TNF受體1型；CD12a；p55/6）和TNF-R2（TNF受體2型；CD12b；p75/8）與TNF-α結合。TNF-α蛋白主要由巨噬細胞產生，大量的這種細胞因子在脂多糖、其他細菌產物和白細胞介素-1（IL-1）的作用下釋放。腫瘤壞死因子α（TNF-α）參與腫瘤的發生，因此被認為是腫瘤治療中的一種分子機制。
二、檢測原理
酶聯免疫吸附實驗（ELISA）是一種固相夾心ELISA（酶聯免疫吸附實驗）。它利用在96孔板上包被人腫瘤壞死因子α的單克隆抗體，將標準品和樣本添加到孔中，使腫瘤壞死因子α與固定化抗體結合，然后加入辣根過氧化物酶結合的小鼠抗人腫瘤壞死因子α的單克隆抗體，產生抗原-抗體-抗原的“三明治”結構。再次清洗并加入TMB基質溶液，其產生的顏色深淺與樣品中人腫瘤壞死因子α的含量成線性關系。結束酶反應，添加停止溶液，并在450nm處讀取微孔吸光度。
三、注意事項
1. 試劑盒應在有效期內使用，請不要使用過期的試劑。 2. 試劑盒未使用時應保存在 2-8℃冰箱，復溶標準品請當天使用。 3. 試劑盒使用前請在室溫下復溫 30 min，配置試劑請充分混勻。 4. 在試驗中標準品和樣本建議作復孔檢測。 5. 為避免交叉污染，請在試驗中使用 1 次性試管，槍頭，封板膜，及潔凈塑料容器。 6. 檢測抗體HRP酶結合物溶液為即用型，請于2-8℃保存，禁止冷凍保存。 7. 除了試劑盒中的濃縮洗滌液，顯色液和終止液可以通用外，請不要使用其他來源試劑盒內含的試劑代替本試劑盒中的某單個組分。 8. 為保證結果準確，每次檢測均需做標準曲線。
四、安全提示
試劑盒中的終止液為酸性溶液，操作人員在使用時請帶上手套并注意防護；在操作過程中也要避免試 劑接觸皮膚和眼睛，如果不慎接觸，請用大量清水清洗；檢測血液樣本及其它體液樣本時，請按國家生物 實驗室安全防護有關管理規定執行。
五、試劑盒組成及儲存
試劑盒組成 
六、自備實驗器材
1． 酶標儀 2． 高精度移液器及一次性吸頭：0.5-10,2-20,20-200,200-1000μl 3． 洗板機 4． 37℃孵育箱 5． 超純水，去離子水 6． 一次性稀釋用聚丙烯試管
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