總膽固醇（TC）含量檢測試劑盒 Total Cholesterol (TC) Content Assay Kit 
一、總膽固醇（TC）含量檢測試劑盒產品描述 膽固醇（Cholesterol）又稱膽甾醇，是廣泛存在于動物體內的一種環戊烷多氫菲衍生物，可作為
合成腎上腺皮質激素、性激素、膽汁酸及維生素 D 等生理活性物質的重要原料，也是構成細胞膜的
主要成分，總膽固醇（TC）是指所有脂蛋白所含膽固醇的總和，包括游離膽固醇和膽固醇酯。
膽固醇酯酶可催化膽固醇酯水解生成游離膽固醇（FC）和游離脂肪酸（FFA），膽固醇氧化酶可
催化游離膽固醇氧化生成?4-膽甾烯酮和 H2O2，過氧化物酶催化 H2O2 氧化 4-氨基安替比林和酚生成
紅色醌類化合物，產物在 500 nm 處具有特征吸收峰，通過吸光值變化即可定量檢測總膽固醇的含量。
二、總膽固醇（TC）含量檢測試劑盒產品內容
三、總膽固醇（TC）含量檢測試劑盒產品使用說明 測定過程中所需要的儀器和試劑：可見分光光度計/酶標儀、微量玻璃比色皿/96 孔板、研缽/勻漿
器、可調式移液器/多道移液器、臺式離心機、恒溫水浴/培養箱、異丙醇和蒸餾水。 總膽固醇的提取（可根據預實驗結果適當調整樣本量及比例） ①細菌或細胞：離心收集細菌或細胞至離心管內，按照細菌或細胞數量（104 個）：提取液體積（mL）
為（500-1000）：1 的比例（建議 500 萬細菌或細胞加入 1 mL 提取液）處理樣品，冰浴超聲破碎（功
率 300 W，超聲 2 s，間隔 3 s，總時間 3 min），4℃ 10000 g 離心 10 min，取上清置于冰上待測。 ②組織：按照組織質量（g）：提取液體積（mL）為 1：（5-10）的比例（建議稱取 0.1 g，加入 1
mL 提取液）處理樣品，冰浴勻漿，4℃ 10000 g 離心 10 min，取上清置于冰上待測。 ③血清（漿）、培養液等液體樣本：直接測定或適當稀釋后再進行檢測。 測定步驟 ①可見分光光度計/酶標儀預熱 30 min 以上，調節波長至 500 nm，蒸餾水調零。 ②TC 工作液的制備（現用現配）：按試劑一：試劑二：試劑三= 1 mL：10 μL：10 μL 的比例配置。 ③在 96 孔板或離心管中依次加入下列試劑：
吸光值測定：測定 500 nm 處吸光值，記為 A 測定、A 標準和 A 空白；計算?A 測定=A 測定-A
空白，?A 標準=A 標準-A 空白。注：空白管只需測定 1-2 次。
標準曲線的建立：以 3.0、2.0、1.0、0.5、0.25、0.125 μmol/mL 標準稀釋液濃度為橫坐標（x），
其對應的?A 標準為縱坐標（y），繪制標準曲線，得到標準方程 y=kx+b，將?A 測定帶入公式中得到
x（μmol/mL）。
3.總膽固醇（TC）含量計算
四、總膽固醇（TC）含量檢測試劑盒注意事項 ①若?A測定超出標準線性吸光值范圍：高于最高值將待測樣本使用提取液適當稀釋后再進行測
定，低于最低值建議適當增加樣本量后再進行測定，計算時相應修改；
②為保證結果準確且避免試劑損失，測定前請仔細閱讀說明書（以實際收到說明書內容為準），
確認試劑儲存和準備是否充分，操作步驟是否清楚，且務必取2-3個預期差異較大的樣本進行預測定，
過程中問題請您及時與工作人員聯系。
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