脲酶（UE）活性檢測試劑盒 Urease (UE) Activity Assay Kit 
一、脲酶（UE）活性檢測試劑盒產品描述 脲酶是能夠專一性催化尿素分解為銨和碳酸的含鎳寡聚酶，廣泛分布于植物種子中，也存在于動
物血液、尿液和部分微生物中，脲酶作為一種重要的生物制劑，在農業、畜牧業、醫療、環境保護、
食品安全監測和建材等領域具有廣泛應用。
脲酶水解尿素產生的 NH3-N，在強堿性介質中能夠與次氯酸鹽和苯酚反應，生成水溶性藍色染料
靛酚藍，產物在 630 nm 處具有特征吸收峰，通過吸光值的變化即可表征脲酶的活性。
二、脲酶活性檢測試劑盒產品內容圖示 
三、脲酶（UE）活性檢測試劑盒產品使用說明 測定過程中所需要的儀器和試劑：可見分光光度計/酶標儀、微量玻璃比色皿/96 孔板、研缽/勻漿
器、可調式移液器、臺式離心機、恒溫水浴/培養箱和蒸餾水。 1.粗酶液的制備（可根據預實驗結果適當調整樣本量及比例）
①細菌或細胞：離心收集細菌或細胞至離心管內，按照細菌或細胞數量（104 個）：提取液體積（mL）
為（500-1000）：1 的比例（建議 500 萬個細菌或細胞加入 1 mL 提取液）處理樣品，冰浴超聲破碎（功
率 300 W，超聲 3 s，間隔 7 s，總時間 3 min），4℃ 12000 g 離心 15 min，取上清置于冰上待測。
②組織：按照組織質量（g）：提取液體積（mL）為 1：（5-10）的比例（建議稱取 0.1 g 組織，加
入 1 mL 提取液）處理樣品，冰浴勻漿，4℃ 12000 g 離心 15 min，取上清置于冰上待測。
③血液（漿）、培養液等液體樣本：直接檢測或適當稀釋后再進行檢測。 2.測定步驟
①分光光度計/酶標儀預熱 30 min 以上，調節波長至 630 nm，蒸餾水調零。
②滅活酶液的制備：取適量粗酶液/液體樣本沸水浴處理 5-10 min（密封以防止水分散失），冷卻
至室溫后即為滅活酶液。 
吸光值測定：測定 630 nm 處吸光值，記為 A 測定、A 對照、A 標準和 A 空白；計算?A 測定=A
測定-A 對照，?A 標準=A 標準-A 空白。注：每個測定組均需設一個對照組，空白組只需測定 1-2 次。
標準曲線的建立：以 6.0、5.0、4.0、2.0、1.0、0.5 μg/mL 為橫坐標（x），以其對應的?A 標準為
縱坐標（y），繪制標準曲線，得到標準方程 y=kx+b，將?A 測定帶入公式中得到 x（μg/mL）。
脲酶（UE）活性檢測試劑盒活性計算圖示
注釋：V 樣：反應體系中加入粗酶液的體積，0.02 mL；V 提：粗酶液總體積，1 mL；V 酶促：
酶促反應體系總體積，0.14 mL；T：反應時間，60 min；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL；W：樣本質量，
g；細菌或細胞數量：以百萬計。
四、脲酶（UE）活性檢測試劑盒注意事項 ①若A測定超出標準吸光值線性范圍：超出最高值建議將粗酶液或反應混合液適當稀釋后再進行
測定；低于最低值可適當增加樣本量后再進行測定，計算時相應修改； ②顯色完成后應在1 h內完成測定，測定管顏色應與標準管顏色一致（藍色），若顯色為黃色或綠
色，則表明NH3-N濃度過高，應將粗酶液或反應混合液適當稀釋后再進行測定，計算時相應修改； ③為保證結果準確且避免試劑損失，測定前請仔細閱讀說明書（以實際收到說明書內容為準），
確認試劑儲存和準備是否充分，操作步驟是否清楚，且務必取2-3個預期差異較大的樣本進行預測定，
過程中問題請您及時與工作人員聯系。
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